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UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ – UESC Kaislan da Paz Lemos Sandra da Silva Silveira Wallace Felipe Blohem Pessoa COLORAÇÃO DE ZIEHL-NEELSEN Relatório solicitado pelo professor Renato Fontana como cumprimento das atividades da disciplina de Bacteriologia Médica. Ilhéus / BA Junho de 2010 SUMÁRIO 1. Introdução .................................................................................................................. 3 2. Fundamento ...............................................
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  UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ – UESCKaislan da Paz LemosSandra da Silva SilveiraWallace eli!e lo#em Pessoa COLORAÇÃO DE ZIEHL-NEELSEN Rela$%rio solici$ado !elo !ro&essor Rena$o on$anacomo c'm!rimen$o dasa$ividades da disci!lina de ac$eriolo(ia )*dica+Il#*'s , A-'n#o de ./0/  SUMÁRIO1. Introdução ++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++ 32. und! #nto +++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++ 33. M!t#r$!%  ++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++ 3&. M#todo%o'$!  ++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++ 3(. R#)u%t!do) # d$)*u))ão  +++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++ &R#+#r,n*$!) +++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++ ( .  1. INRODUÇO 12 3ac$*rias 4'e s5o resis$en$es 6 colora75o8 mas 4'e 'ma vez coradas v5o resis$ir &or$emen$e 6 descolora75o8 mesmo !or 2cidos &or$es dil'9dos e 2lcool a3sol'$o+ :s 3ac$*rias 4'e !oss'em es$a !ro!riedade dizemos 4'e s5o 2cido;2lcool resis$en$es<(=neros  Mycobacterium  e  Nocardia >+ Es$a carac$er9s$ica * devida ao elevado $eor del9!idos es$r'$'rais <e?+ 2cido mic%lico> na !arede cel'lar des$as 3ac$*rias8 4'e !rovoca'ma (rande #idro&o3icidade8 di&ic'l$ando a a75o dos morden$es e di&erenciadores decoran$es a4'osos+ A $*cnica de Zie#l;Neelsen evidencia es$a 2cido;2lcool resis$=ncia+ 2. UNDAMENO @ dia(n%s$ico das )ico3ac$*rias !a$o(=nicas <  Mycobacterium tuberculosis  e  Mycobacterium leprae >8 !or 3ac$eriosco!ia dire$a * &ei$o a$rav*s do m*$odo decolora75o de Zie#l;Neelsen8 o 4'al '$iliza a carac$er9s$ica des$as 3ac$*rias de !oss'9rem !aredes cel'lares com al$o $eor de li!9deos <cerca de / B 8 !rinci!almen$e de 2cidomic%lico>8 4'e 4'ando $ra$adas !elo coran$e &'csina &enicada8 coram;se de vermel#o e !ersis$em ao descoramen$o s'3se4en$e !or 'ma sol'75o de lcool;2cido &or$e<di&erenciador>+  !or is$o 4'e s5o con#ecidas !or 3acilos 2lcool;2cido resis$en$es< AAR>+ As o'$ras 3ac$*rias8 4'e n5o !oss'em $ais !aredes cel'lares ricas em li!9deos8$=m a s'a colora75o !ela &'csina descorada !ela sol'75o de 2lcool;2cido e coram;se emaz'l !ela colora75o de &'ndo do Az'l de me$ileno <con$ra;coran$e>+ 3. MAERIAL ã )icro;or(anismo ã LFminas ã 'csina &enicada <de Zie#l> o' car3ol&'csina ã Sol'75o de 2lcool;2cido <1Cl GB> ã Az'l de me$ileno ã Lam!arina8 3ico de 'nsen o' similar  ã ('a des$ilada &. MEODOLO/IA1. Pre!arar 'm es&re(a7o #omo(=neo8 del(ado e iden$i&icado em 'ma lFmina novadesen(ord'rada8 lim!a e secaH 2. Dei?ar secar 6 $em!era$'ra am3ien$eH 3. i?ar o ma$erial do es&re(a7o !assando G a  vezes !ela c#ama do 3ico de 'nsenH &. Co3rir a $o$alidade da s'!er&9cie do es&re(a7o com sol'75o de &'csina &enicada8 !reviamen$e &il$rada o' &il$rado so3re a lFmina no momen$o da colora75oH (. Dei?ar a(ir !or cerca de J min'$os8 a4'ecendo 3randamen$e '$ilizando a c#ama do 3ico de 'nsen <o' similar>8 !assando len$amen$e !or 3ai?o da lFmina8 a$* 4'e seG   !rod'za emiss5o de va!ores e8 4'ando es$es s5o vis9veis8 cessar o a4'ecimen$o+Re!e$ir essa o!era75o a$* com!le$ar $r=s emisses s'cessivas+ Evi$ar a &erv'ra eseca(em do coran$e <adicionar mais coran$e8 se !reciso8 den$ro des$e !er9odo !araevi$ar 4'e a lFmina se4'e !or4'e o es&re(a7o !recisa es$ar co3er$o !ermanen$emen$ed'ran$e o a4'ecimen$o+>+ Es$e a4'ecimen$o deve ser in$ermi$en$e8 !ois * im!or$an$eman$er a sol'75o a4'ecida d'ran$e o $em!o !revis$oH 0. Lavar em 2('a corren$e !ara eliminar a &'csina+ Toma;se a lFmina !elo e?$remon'merado8 inclinar !ara &ren$e e lavar dei?ando cair 'm a$o dM2('a de 3ai?a !ress5oso3re a !el9c'la corada8 de maneira 4'e essa n5o se des!rendaH . Co3rir $oda a s'!er&9cie do es&re(a7o com a sol'75o de 2lcool;2cido+ Tomar a lFminaen$re o !ole(ar e o indicador e &azer 'm movimen$o de vai;e;vem8 de modo 4'e olcool;2cido v2 descorando s'avemen$e a &'csina+ Se o es&re(a7o es$iver ainda coma cor vermel#a o' rosada8 descora;se novamen$e+ Considera;se descorado oes&re(a7o8 4'ando s'as !ar$es mais (rossas conservarem somen$e 'm li(eiro $omrosado+ Essa o!era75o d'ra8 em (eral8 dois min'$osH . Terminada a &ase de descolora75o e eliminado o 2lcool;2cido8 lavar a lFmina damesma &orma como se !rocede' de!ois da colora75o com a &'csina8 com c'idado !ara n5o des!render a !el9c'laH . Co3rir $oda a s'!er&9cie do es&re(a7o com sol'75o de az'l de me$ileno d'ran$e G/se('ndos a 0 min'$oH 14. Lavar8 da mesma &orma como se indico' !ara a &'csina8 $an$o o es&re(a7o como a !ar$e in&erior da lFminaH 11. Colocar a lFmina com o es&re(a7o !ara cima8 so3re o !a!el lim!o8 !ara secar 6$em!era$'ra am3ien$e o' es$'&a a GJ CH 12. @3servar ao microsc%!io com o3e$iva de imers5o <0// ?>+ (. RESULADOS E DISCUSSÃO  Nes$a colora75o8 as 3ac$*rias 2lcool;2cido resis$en$es coram;se em vermel#o8 !ois n5oso&rem a75o da sol'75o descoloran$e 2lcool;2cido+ -2 os demais micro;or(anismos ear$e&a$os coram;se8 !rimariamen$e com &'csina8 e8 a!%s adi75o da sol'75o de 2lcool;2cido8 descoram;se8 a3sorvendo em se('ida o !i(men$o az'l do con$acoran$e az'l deme$ileno < $'ur! 1 >+ @ o3e$ivo de a4'ecer o es&re(a7o * 4'e a Onica &orma da &'csina !ene$rar nos micro;or(anismos 2lcool;2cido resis$en$es * a4'ecendo;se a lFmina+ Por $almo$ivo8 $al $*cnica $*cnica $am3*m * con#ecida como colora75o a 4'en$e+
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